荧光定量PCR

服务简介

Real Time PCR技术即是在PCR反应体系中加入荧光物质,利用荧光信号积累实时监控整个PCR进程,对未知模板进行定量的分析。因其无需电泳,且具有快速性及定量性而备受青睐。本公司承接利用Real Time PCR法进行课题研究的技术服务,可从引物设计合成开始,到Real Time PCR反应检测的全程一站式技术服务。

服务项目

u  绝对定量

u  相对定量

u  RNAi效果确认(siRNA的筛选)

服务说明

u  绝对定量

   绝对定量首先必须构建与检测样品目的基因具有相同的序列标准品。使用已知浓度的标准品制作5个点以上的标准曲线后,可以使用标准曲线对未知浓度的检测样品进行绝对量(起始拷贝数)分析。

u  相对定量(mRNA表达量分析)。

基因表达研究一般采用相对定量的方法。相对定量法必须对样品的目的基因和参比基因同时分别进行定量,然后求出对于参比基因的目的基因的相对量。通过对样品间的目的基因的相对量进行比较,可以对不同样品的mRNA进行表达量的分析。参比基因通常选用表达量相对恒定的HousekeepingGene,如GAPDH、β-action等。通过同时对参比基因的实时检测,可以对样品之间由于起始细胞数不同或RNA提取效率的不同等造成的RNA量误差进行校正,达到在严格意义上对样品之间的mRNA表达量进行分析的目的。

价格 实验周期

注：

u  以上技术报价是以提纯的核酸(即:DNA或RNA)为起始材料设定的,如果需要进行核酸纯化时,费用另计。

u  无相对定量检测时,若客户要求构建RNA标准品或因客户提供的RNA不能作为标准品时,构建RNA标准品的费用另计。价格请具体垂询!

u  相对定量分布方法采用CT法或双标准曲线法。客户可以根据需要自行选择。

u  特如因实验材料等非公司原因造成某实验步骤失败,使实验提取终止,已启动的实验项目仍正常收费。

提供结果

u  实验报告

u  Real time PCR反应及定量分析

送样要求

u  进行mRNA表达量分析时,请寄送足量的并且保证纯度的RNA(浓度在500ng/μl以上,体积在20μl以上)。如果目的基因表达量低时,应尽量提供更高浓度的RNA。

u  如果提供的材料为细胞或组织,DNA、RNA的提取费用另收。同时应保证材料新鲜,动物细胞数为10⁶以上,动物组织为100mg以上。

u  请仔细填写【技术服务委托书—荧光定量PCR】。您可以在本公司网站的“技术服务”中下载获得表格,填写后通过传真或E-mail发送我们或当地代理商。